口蹄疫病毒以傳播速度快，發(fā)病率高被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)列為A類(lèi)烈性傳染病,我國(guó)將其列為一類(lèi)傳染病。目前，發(fā)達(dá)國(guó)家控制FMD主要采取撲殺，無(wú)害化處理等措施，從源頭控制FMD的流行；亞洲、非洲、歐洲一些國(guó)家主要以疫苗免疫來(lái)防控口蹄疫的發(fā)生與流行。疫苗免疫后抗體效價(jià)的評(píng)價(jià)，這就需要根據(jù)免疫計(jì)劃，定時(shí)采血評(píng)價(jià)免疫效果。以下是本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)三種試劑盒對(duì)同一批血樣檢測(cè)結(jié)果的分析。
正向間接血凝試驗(yàn)是將抗原吸附(致敏)于與免疫無(wú)關(guān)的顆粒性載體(紅細(xì)胞)表面,然后與相應(yīng)的抗體作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下發(fā)生肉眼可見(jiàn)的特異性凝集現(xiàn)象。在基層動(dòng)物防疫工作中,由于各方面條件不足,為了準(zhǔn)確進(jìn)行免疫效果評(píng)估和疫情預(yù)測(cè),正向間接血凝試驗(yàn)成為小型養(yǎng)殖戶(hù)和基層試驗(yàn)方法。
口蹄疫O型抗體快速檢測(cè)卡采用夾心法設(shè)計(jì)。將膠體金顆粒標(biāo)記的純化口蹄疫病毒O型抗原1噴吐于結(jié)合墊上，干燥備用。而將純化的口蹄疫病毒O型抗原2和口蹄疫病毒O型抗體IgG調(diào)整至工作濃度，分別噴涂于NC膜的檢測(cè)帶（T）和質(zhì)控帶(C)上。稀釋好的樣品血清從樣品墊流向金標(biāo)成品膜。樣品中所含的抗體會(huì)在檢測(cè)帶的位置上與標(biāo)記的抗原結(jié)合發(fā)生相應(yīng)的反應(yīng)。質(zhì)控帶上發(fā)生的反應(yīng)用以確定試紙條上液體正確的流向。
液相阻斷ELISA是將預(yù)先滴定好的病毒抗原與被檢血清首先在液相中反應(yīng)，然后將抗原抗體復(fù)合物轉(zhuǎn)移到包被了口蹄疫特異性抗體的ELISA板中，沒(méi)有*被血清抗體阻斷的病毒抗原ELISA板中抗體捕獲，再通過(guò)酶結(jié)合物與底物顯色。按照試驗(yàn)孔呈現(xiàn)顏色。通過(guò)酶標(biāo)儀讀值，來(lái)判定抗體效價(jià)。
正向間接血凝 （HIA）、液相阻斷ELISA、金標(biāo)試紙條是現(xiàn)階段常用的口蹄疫O型抗體檢測(cè)方法，但在實(shí)際應(yīng)用中過(guò)程中仍存在某些問(wèn)題，主要是不同檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果存在差異，造成結(jié)果解釋困難。為更好分析實(shí)際檢測(cè)結(jié)果，科學(xué)理解和選擇檢測(cè)方法，本試驗(yàn)選用了3種不同的檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，對(duì)口蹄疫O型抗體不同檢測(cè)方法之間的一致性和差異性結(jié)果進(jìn)行了詳細(xì)全面分析。
